La recherche sur les bactéries nécessite un travail minutieux avec de nombreux équipements et instruments. Pour que les micro-organismes se multiplient le plus rapidement possible dans des conditions de laboratoire et puissent maintenir une activité vitale normale, des milieux nutritifs spéciaux sont utilisés. Leur composition et leurs conditions biophysiques conviennent à la croissance active d'une culture bactérienne.
Milieux nutritifs. Microbiologie et autres applications
Les colonies bactériennes sont cultivées en laboratoire sur des boîtes de Pétri remplies d'un contenu gélatineux ou semi-liquide. Ce sont des milieux nutritifs dont la composition et les propriétés sont aussi proches que possible des milieux naturels pour une croissance des cultures de haute qualité.
De tels environnements sont utilisés dans la recherche microbiologique et dans les laboratoires de diagnostic médical. Ces derniers travaillent le plus souvent avec des frottis de bactéries pathogènes ou opportunistes dont la position systématique est déterminée directement dans l'établissement.
Naturel et synthétiqueMercredi
La règle de base du travail avec des bactéries est la sélection correcte du milieu nutritif. Il doit répondre à de nombreux critères, dont la teneur en micro et macro éléments, les enzymes, une valeur constante d'acidité, la pression osmotique, ou encore le pourcentage d'oxygène dans l'air.
Les supports nutritifs sont classés en deux grands groupes:
- Environnements naturels. Ces mélanges sont préparés à partir d'ingrédients naturels. Il peut s'agir d'eau de rivière, de parties de plantes, de fumier, de légumes, de tissus végétaux et animaux, de levures, etc. De tels environnements se caractérisent par une forte teneur en produits chimiques naturels, dont la variété favorise la croissance de la culture bactérienne. Malgré ces avantages évidents, les milieux naturels ne permettent pas une recherche spécialisée avec des souches bactériennes spécifiques.
- Médias synthétiques. Ils diffèrent en ce que leur composition chimique est connue dans les rapports exacts de tous les constituants. De tels milieux sont préparés pour une culture spécifique de bactéries dont le métabolisme est connu à l'avance du chercheur. En effet, pour cette raison, il est possible de préparer un tel environnement synthétique pour le développement de micro-organismes. Ils sont utilisés pour analyser l'activité vitale des bactéries. Par exemple, vous pouvez savoir quelles substances ils libèrent dans l'environnement et en quelle quantité. Les micro-organismes se développeront également dans les milieux naturels, mais il est impossible de suivre les changements quantitatifs dans la composition en raison de l'ignorance des proportions initiales des substances.
Différentiel-environnements de diagnostic
En travaillant avec des bactéries, il n'est pas seulement possible d'utiliser des milieux nutritifs ordinaires. La microbiologie est une vaste science, et par conséquent, lors de la réalisation d'une étude, il est parfois nécessaire de faire une sélection de micro-organismes pour une raison quelconque. L'utilisation de milieux de diagnostic différentiel en laboratoire permet de sélectionner sur boîte de Pétri les colonies bactériennes souhaitées en fonction du signe biochimique de leur activité vitale.
La composition de tels environnements comprend toujours les composants suivants:
1. Nutriments pour la croissance cellulaire.
2. Substrat analysé (substance).
3. Un indicateur qui donnera une couleur caractéristique lorsqu'une certaine réaction se produit.
Un exemple est le milieu nutritif de diagnostic différentiel "Endo". Il est utilisé pour sélectionner des colonies de bactéries capables de dégrader le lactose. Initialement, ce milieu a une couleur rosée. Si une colonie de micro-organismes n'est pas capable de décomposer le lactose, elle prend la couleur blanche habituelle. Si les bactéries peuvent décomposer ce substrat, elles se transforment en une couleur rouge vif caractéristique.
Les mercredis électifs
Les laboratoires de diagnostic utilisent souvent des écouvillons contenant de nombreux types de bactéries. Évidemment, pour un travail de qualité, il faut en quelque sorte sélectionner les colonies dont nous avons besoin parmi des dizaines d'étrangers. C'est là qu'un milieu de croissance bactérienne peut aider, idéalement formulé pour ne supporter qu'un seul type de micro-organisme.
Par exemple,un tel environnement électif ne convient qu'à la reproduction d'Escherichia coli. Ensuite, à force de semer de nombreuses bactéries sur une boîte de Pétri, on ne verra que des colonies du même Escherichia coli et pas plus. Avant de commencer les travaux, il est nécessaire de bien connaître le métabolisme de la bactérie étudiée afin de réussir à la sélectionner parmi un mélange d'autres espèces.
Milieux de culture solides, semi-solides et liquides
Les bactéries peuvent être cultivées non seulement sur des substrats solides. Les milieux nutritifs diffèrent les uns des autres par leur état d'agrégation, qui dépend de la composition lors de la fabrication. Au départ, ils ont tous une consistance liquide, et lorsque de la gélatine ou de l'agar est ajouté dans un certain pourcentage, le mélange se solidifie.
Les milieux de culture liquides se trouvent généralement dans des tubes à essai. S'il devient nécessaire de cultiver des bactéries dans de telles conditions, ajoutez une solution avec un échantillon de culture et attendez 2-3 jours. Le résultat peut varier: un précipité se forme, un film apparaît, de petits flocons flottent ou une solution trouble se forme.
Le milieu de culture dense est souvent utilisé dans la recherche microbiologique pour étudier les propriétés des colonies bactériennes. Ces milieux sont toujours transparents ou translucides afin qu'il soit possible de déterminer correctement la couleur et la forme de la culture de micro-organismes.
Préparation des médias
Les substrats tels que les mélanges viande-peptone à base de bouillon, de gélatine ou d'agar sont très faciles à préparer. Si vous avez besoin de transformer un substrat solide ou semi-liquide en liquideajouter 2-3% ou 0, 2-0, 3% de gélatine ou d'agar, respectivement. Ils jouent un rôle majeur dans le durcissement du mélange, mais ils ne sont pas une source de nutriments. On obtient ainsi des milieux nutritifs adaptés à la croissance d'une culture bactérienne.
