Cet article sera consacré au phénomène de la réaction de précipitation. Ici, nous examinerons les caractéristiques de la formulation de ce phénomène, le phénomène de diffusion, les caractéristiques générales, le rôle dans la vie humaine et bien plus encore.
Introduction au phénomène
La précipitation est un phénomène de type sérologique, au cours duquel des antigènes solubles interagissent avec des anticorps et, par conséquent, une précipitation est observée - un précipité.
La caractéristique générale de la réaction de précipitation est une forme de influence coordonnée de l'antigène et de l'anticorps. Ces types d'interactions permettent de déterminer la présence d'antigènes inconnus dans la substance d'essai en ajoutant des anticorps et des antigènes connus. Le processus de précipitation sans la présence de sels s'aggravera et le meilleur optimum se situe entre 7,0 et 7,4 pH.
Constituants d'une réaction
Il y a trois éléments principaux parmi les composants de la réaction de précipitation:
- Antigène de nature moléculaire. Il est à l'état de type fin, c'est-à-dire qu'ilsoluble. En outre, un tel antigène est appelé précipitogène, qui est un lysat ou un extrait de tissu, etc. Un précipitogène présente une différence caractéristique par rapport à un agglutinogène, qui réside dans la taille des particules qui le composent. L'agglutinogène a une taille de cellule inhérente et les précipitogènes sont proportionnels à la taille de la molécule. La solution d'antigène se caractérise par sa transparence.
- Un anticorps trouvé dans le sérum sanguin humain, ainsi que dans le sérum de diagnostic immunitaire, qui contient les anticorps étudiés.
- Les électrolytes sont des solutions de chlorure de sodium isotoniques.
Production de précipitogène
La mise en place d'une réaction de précipitation est impossible sans un précipitogène, qui est obtenu en broyant des matériaux et en en extrayant des antigènes protéiques. L'extraction se produit par ébullition ou par d'autres méthodes. exemple de précipitogènes.
Mise en place sous les précipitations
Considérons maintenant la méthode de mise en place de la réaction de précipitation.
Une réaction de précipitation annulaire est effectuée, qui a lieu dans des tubes à essai spécialement préparés. Le sérum est introduit dans la cavité de la vaisselle, en le versant sur le mur à l'aide d'un bec de pipette. Ensuite, la quantité appropriée de précipitateur est soigneusement déposée sur le dessus, puis le tube est amené à une position verticale à partir d'une position horizontale. La mise en place et la prise en compte de la réaction de précipitation est une opération très minutieuse. Le résultat est enregistré après l'apparition d'un anneau blanc à la frontière entre l'antigène et l'anticorps. Si les éléments réactifs de la réaction se correspondent, ils se lient, mais cela devient perceptible après une longue période de leur interaction.
La réaction de précipitation est également effectuée dans une boîte de Pétri ou sur un verre diapositive, où le gel d'agar est transféré, en l'appliquant en petite couche. Après durcissement dans le gel, un petit nombre de puits sont découpés dans lesquels les antigènes et les anticorps seront placés. Il existe deux façons d'effectuer cette action: la méthode d'immunodiffusion radiale et la double immunodiffusion.
Informations générales
La mécanique du travail de précipitation est similaire à l'appareil d'agglutination. Sous l'influence du sérum de type immunitaire, l'antigène, qui est déjà entré dans la réaction, réduit son degré de dispersité. Une condition importante est la transparence du sérum et de l'antigène.
Vous pouvez améliorer l'enregistrement de la réaction si vous superposez des antigènes sur des anticorps. De ce fait, on peut observer l'apparition de précipités sous forme d'anneau. Ce phénomène est appelé précipitation annulaire et s'effectue dans des tubes spéciaux d'un diamètre de 2,5 à 3,5 mm. L'un des exemples les plus courants de réaction de précipitation est le diagnostic de charbon.
La précipitation permet de déterminer le niveau de toxigénicité d'une culture de diphtérie en gélose.
Au cours de la réaction considéréeil se produit une précipitation de complexes antigéniques et d'anticorps. La précipitation est un phénomène immunologique qui vous permet de déterminer la quantité d'anticorps dans le sérum sanguin d'une personne et d'animaux malades ou vaccinés.
Conséquence du titrage
Il est important de savoir que les données obtenues par titrage de la méthode ci-dessus ne sont pas quantifiables. Pour créer et analyser une évaluation quantitative du nombre d'anticorps contenus, une technique de réaction spéciale a été développée par M. Heidelberger et E. Kabat, qui est basée sur la recherche et l'identification de la zone d'équivalence. Le mélange du nombre d'âge des antigènes avec un volume constant d'antisérum entraîne une augmentation du précipité initialement formé, puis il diminue à nouveau en raison d'une augmentation de la capacité à dissoudre les complexes antigéniques. En déterminant la quantité d'anticorps dans les surnageants contenus dans chaque tube, vous pouvez constater qu'un certain nombre de boîtes contenant des anticorps manqueront de liquide. Ici, en comparaison avec d'autres tubes à essai, le plus gros précipité se formera. Grâce à cela et à la soustraction du précipité de protéines antigéniques de la valeur totale des protéines, il est possible d'obtenir la valeur exacte des anticorps contenus dans le volume de sérum spécifique étudié. De plus, la quantité de molécules de protéines du précipité est déterminée par la quantité d'azote ou en utilisant des méthodes colorimétriques.
Évaluation des valeurs
L'estimation des valeurs de précipitation dans la méthodologie de diagnostic doit tenir compte de la possibilité de présence dans le sérum immun d'un anticorps qui n'a pas la propriété de précipitine, d'où il s'ensuit que le précipité lui-même peut ne pas être formé après réaction avec des antigènes. La liste de ces molécules comprend des anticorps incomplets et certaines espèces du groupe des globulines gamma-A.
La réaction de précipitation dans des conditions de laboratoire trouve son application dans divers types de modifications. Par exemple, la réaction de thermoprécipitation est utilisée pour détecter des antigènes bactériens du botulisme, de l'anthrax, etc., qui ne subissent pas de dénaturation thermique. Contrairement à la précipitation annulaire, ce type de réaction utilise des filtrats du matériau en question à l'état bouilli.
L'analyse de la réaction de précipitation dans un mélange complexe ne permet pas de caractériser les propriétés des éléments individuels du mélange. Dans de tels cas, une personne a recours à la méthode de précipitation dans la gélose et utilise également l'immunoélectrophorèse.
Précipitations diffuses
Dans ce domaine de recherche, il existe le concept de réaction de précipitation diffuse (RPD). Elle repose sur la capacité à diffuser dans le gel des anticorps et des antigènes solubles. La diffusion est la capacité d'une molécule d'une certaine substance à pénétrer dans les molécules d'une autre, qui est causée par un mouvement thermique.
Le gel est un système de type dispersé dans lequel la phase liquide est répartie uniformément dans la phase solide. Le plus souvent, le gel d'agar est utilisé pour une telle réaction.
Après avoir donné les paramètres, dansconditions dans lesquelles les molécules peuvent diffuser les unes par rapport aux autres, leur rencontre s'accompagnera de la formation d'un complexe antigène + anticorps. Un tel néoplasme est capable de diffuser, étant dans le gel lui-même, et il précipitera, prenant la forme d'une bande détectable à l'œil nu. Si l'antigène et l'anticorps sont homologues, aucune bande ne se formera. décider du type de tâche requis. La RPD donne à une personne la capacité de détecter et d'identifier des virus isolés inconnus en les testant à l'aide de sérums d'anticorps connus.
Demande
Les précipitations sont largement utilisées non seulement dans le diagnostic des maladies, mais trouvent également leur application dans les examens médico-légaux. Il est difficile d'imaginer une analyse dans laquelle il est possible de déterminer l'espèce de sang, de partie d'organe ou de tissu trouvé sur une arme criminelle qui n'utilise pas la réaction de précipitation. Au cours de ce processus, des sérums précipitants sont utilisés, qui sont obtenus en immunisant divers animaux et oiseaux. Il est important que le niveau de titre sérique ne soit pas inférieur à 1:10000, et il doit également avoir une spécificité suffisante. De la tache de sang détectée ou de sa croûte, un extrait est fait pour le physique. solution, qui sera ensuite exposée àprécipiter le sérum. Selon cette réaction, il est possible d'établir les types de protéines tissulaires et organiques des humains et des animaux. L'obtention d'extraits troubles oblige à recourir à la précipitation sur gélose.
Conclusions
En analysant les informations lues, nous pouvons conclure que les réactions de précipitation sont extrêmement importantes pour une personne, car elles permettent de diagnostiquer divers antigènes à l'aide d'anticorps, ce phénomène est également largement utilisé dans les examens médico-légaux et vous permet d'identifier le type de sang, tissu ou organe par rapport à un sujet particulier. Il existe plusieurs types et méthodes de précipitation, qui sont utilisés en fonction des besoins émergents du problème à résoudre.
