La méthode d'observation microscopique par immersion implique l'introduction d'un liquide spécial entre la lentille de l'appareil et l'objet à l'étude. Il améliore la luminosité et élargit la portée du grossissement de l'image. Ainsi, l'objet peut être agrandi de manière significative et ses plus petits éléments peuvent être examinés sans changer d'équipement. En conséquence, le liquide est appelé immersion. Il peut servir à une variété de compositions. Le plus populaire est l'huile d'immersion. Examinez ses fonctionnalités plus en détail.
Informations générales
La première huile d'immersion pour la microscopie était du cèdre. Cependant, il avait un inconvénient important. Au fil du temps, ses propriétés ont changé et il n'a pas permis d'obtenir les résultats souhaités. A l'air libre, le liquide a commencé à se condenser progressivement (jusqu'à durcir). En conséquence, l'indice de réfraction a également changé. Au 20e siècle, l'huile d'immersion synthétique a commencé à être produite. Ce liquide n'avait pas la déficience ci-dessus.
Normes d'huile d'immersion
Cléles paramètres de fluide sont définis dans GOST 13739-78. Selon la norme, l'huile d'immersion a:
- indice de réfraction nd=1,515±0,001;
- transmittance dans la gamme spectrale de 500 à 700 nm avec une épaisseur de couche de 1 mm - 95 %, de 400 à 480 nm - 92 %;
La température optimale à laquelle l'huile d'immersion peut être utilisée est de 20 degrés. Il existe également des normes internationales. Selon la norme ISO 8036/1, l'indice de réfraction est de 1,518 + 0,0005, et la transmission à une couche de 10 mm pour la plage spectrale de 500 à 760 nm est de 95 %, et à 400 nm, elle est de 60 %.
Les paramètres indiqués correspondent à une huile d'immersion non fluorescente. La norme ISO 8036-1/2 définit les caractéristiques des liquides pour la luminescence. La transmission dans la gamme spectrale de 500 à 700 nm dans une couche de 10 mm est de 95 %, de 365 à 400 nm - 60 %.
Difficultés des divergences de paramètres
Une différence identifiable dans les normes ci-dessus peut entraîner une détérioration des performances d'un objectif particulier lors de l'utilisation d'un fluide inapproprié. Résultat:
- Le contraste est réduit en raison de l'aberration sphérique.
- Le champ de l'objet de recherche est coloré.
- L'éclairage dans le plan de l'objet étudié et dans la zone de formation de son image devient inégal.
- L'image devient floue.
Nuances
Les microscopes optiques ont une limite supérieure de résolutionun peu plus de 100 fois. A ce niveau de grossissement, l'éclairage de l'objet étudié doit être de bonne qualité. Sinon, l'image résultante sera si sombre qu'il sera impossible de voir l'objet. Le fait est que la réfraction et la diffusion de la lumière se produisent entre le verre de protection et l'objectif. L'huile d'immersion contribue à sa plus grande capture. En conséquence, l'image devient plus claire.
Caractéristiques de la réfraction de la lumière
Comment obtenez-vous une image claire ? Dans différents milieux, la réfraction de la lumière se produit de différentes manières. Par exemple, les angles de réfraction des rayons dans l'air et le verre sont différents. Dans le premier cas, l'indicateur est 1,0, dans le second - 1,5. C'est le principal problème.
L'utilisation d'huile permet de réduire l'indice de réfraction des rayons qui traversent l'objet étudié. Le fait est que le liquide a le même paramètre que le verre. En conséquence, un milieu homogène se forme entre la lame et la lentille, et la majeure partie de la lumière traversant l'objet pénètre dans l'instrument. Il en résulte une image claire.
Points techniques
En règle générale, les barillets des lentilles à immersion sont gravés à l'huile. L'élément lui-même est utilisé lorsqu'une ouverture de 1,0 ou plus est nécessaire. De telles lentilles « à immersion » sont utilisées pour une immersion directe dans un liquide. À cet égard, ils sont complètement scellés. Cela offre une protection élevée contre les dommages causés par l'huile aux lentilles.
Classification
Les huiles sont utilisées dans la pratiquedeux viscosités: haute (type B) et basse (A). Souvent, sur l'emballage, vous pouvez trouver des informations sur l'indice de réfraction. Par exemple, ils produisent de l'huile d'immersion (100 ml) dont l'indice de réfraction est de 1,515. Des liquides à faible viscosité sont appliqués dans l'espace aérien et à haute viscosité - avec des condenseurs.
Conditions d'utilisation
Pour obtenir une image claire de l'objet étudié, vous devez suivre des recommandations assez simples:
- Trouvez l'objet à l'étude sur le curseur au centre du champ avec une petite augmentation. Pour cela, une lentille à faible grossissement est utilisée.
- Tourner la tourelle.
- Introduire la lentille 100x en position de travail.
- Déposer une goutte d'huile sur la lame de verre, la seconde sur la lentille.
- Ajustez la distance de travail avec une mise au point fine jusqu'à ce que le sujet soit clairement visible.
Des précautions doivent être prises lors du travail. Il est important d'empêcher l'air de pénétrer entre la lamelle et l'objectif.
Huile d'immersion "Minimed"
Liquid est utilisé lorsque vous travaillez avec des lentilles achromatiques et apochromatiques de tout type d'appareils, à l'exception des luminescents. Selon les experts qui ont utilisé cette huile d'immersion, elle possède plusieurs propriétés utiles. Le liquide améliore considérablement la visibilité de l'objet, minimisant l'éblouissement, la perte de lumière et les aberrations optiques. L'utilisation d'huile élargit considérablement la gamme des capacités de l'équipement.
Nettoyageéquipement
Après avoir travaillé avec de l'huile d'immersion, il est nécessaire de mettre l'appareil en ordre. Le nettoyage doit être fait avant que la lentille ne sèche. Un papier à lentille propre est utilisé pour éliminer les résidus d'huile. Une feuille roulée est utilisée pour nettoyer toutes les surfaces vitrées. Le papier pour lentilles doit être humidifié avec une solution pour lentilles et toute huile restante doit être retirée.
Contexte historique
Le premier scientifique à avoir expliqué le mécanisme de l'immersion fut Robert Hooke. En 1678, son livre Microscopium est publié, dans lequel toutes les explications sont données. En 1812, l'immersion a été proposée comme moyen de corriger les aberrations de l'objectif. L'auteur de l'idée était David Buster. Vers 1840, les premières lentilles à immersion sont fabriquées. Leur créateur était D. B. Amici. Initialement, les chercheurs ont utilisé des huiles d'anis comme liquide d'immersion. L'indice de réfraction était proche de celui du verre.
